استخدام نقطة فيLUNA-FX7 ™ تحسين تقييم خلايا الحيوانات المنوية التلقائي عداد الكريات

الكلمات الرئيسيةالتلقائي عداد الكريات ، صورة القائم على تقييم الحيوانات المنوية ، خلية العد ، معدل البقاء على قيد الحياة ، ضعف تلطيخ

1 مقدمة

تقييم خلايا الحيوانات المنوية ( وتسمى أيضا تحليل السائل المنوي ) يلعب دورا هاما في تحديد الإمكانات الإنجابية للذكور . على الرغم من أنها ليست مؤشرا مباشرا على الخصوبة ، خصوبة الذكور لها تأثير كبير على الخصوبة البشرية وتربية الحيوانات ، وبالتالي فإن تقييم الحيوانات المنوية قد جذبت الكثير من الاهتمام .

في الوقت الحاضر ، الحيوانات المنوية يمكن تقييمها من قبل قياس التدفق الخلوي و الصورة القائمة على أدوات التحليل . نقطة في luna-fx7 ™ التلقائي عد الخلايا وغيرها من معدات التشغيل الآلي يمكن استخدام الصور بسرعة وسهولة تحليل عينات الحيوانات المنوية . ومع ذلك ، لأن خلايا الحيوانات المنوية هي فريدة من نوعها في التشكل والخصائص بالمقارنة مع خلايا الثدييات ، فمن الضروري لتحسين معايير التحليل واختيار الأصباغ المناسبة . . . . . . .

في هذه الورقة ، الأصباغ الفلورية مثل سيبر 14 ، أكريدين البرتقال ( آو ) و ( بي ) تم مقارنتها وتحليلها . ™ القدرة على تقييم خلايا الحيوانات المنوية . تهدف هذه الدراسة إلى تقييم فعالية تركيبات مختلفة من الأصباغ ، وتحسين معايير تقييم الحيوانات المنوية .

2 طرق و مواد

2.1 إعداد العينة

عينة من السائل المنوي المجمد من الماشية كان مذاب و برنامج تلفزيوني تم استبدال العازلة . السائل المنوي المخفف في برنامج تلفزيوني في نسبة من 1 : 20 إلى 1 : 40 ، اعتمادا على حالة العينة .

2.2 مضان تلطيخ

1 . مزيج :

الحيوانات المنوية في 18 ميكرولتر من برنامج تلفزيوني

2 μ ل مزيج من الأخضر والأحمر الأصباغ الفلورية

2 - احتضان لمدة 10 دقائق في 37 ℃ . . . . . . .

3 . تحميل العينة على الشريحة المناسبة

4 - استخدام نقطة luna-fx7 ™ إجراء تحليل

الجدول 1 - لونا - FX7 ™ تحسين وضع معايير تقييم الحيوانات المنوية في وضع متقدم

3 خلية العد و صبغ مزيج لتحسين تقييم الحيوانات المنوية

ملخصسيبر 14 / بي و آو / بي تلطيخ مزدوجة مناسبة لتقييم حركة الحيوانات المنوية ، ولكن سيبر 14 / بي أفضل .

نقطة في luna-fx7 ™ على الرغم من أن البروتوكول الافتراضي هو الأمثل للحصول على خلايا الثدييات المشتركة ، تحتاج إلى تعديل معايير تقييم الحيوانات المنوية ، مثل التعرض ، حجم الخلية ، و فعلى سبيل المثال ، تم تعديل الحد الأدنى لحجم البحث من 3 ميكرومتر إلى 7 ميكرومتر ، وتم تعديل حساسية إزالة التكتل من 5 إلى 7 لتحسين أداء الكشف ( الجدول 1 ) . وبالإضافة إلى ذلك ، فإن مستويات التعرض سيبر 14 / بي و آو / بي تلطيخ مجموعة فرنك غيني 6 و الترددات اللاسلكية 9 ، على التوالي .

على هذا الأساس ، ونحن مقارنة وتحليل sybr14 / بي و آو / بي طريقة الصباغة . وبالنظر إلى فعالية sybr14 / بي تلطيخ في تقييم الحيوانات المنوية ، ونحن نشعر بالقلق إزاء أداء آو / بي تلطيخ . وأظهرت النتائج أن اثنين من أساليب تلطيخ يمكن استخدامها لتقييم الحيوانات المنوية ( الشكل 1 ) . ومع ذلك ، فإن تطبيق sybr14 متفوقة على آو في الحيوانات المنوية تلطيخ ، مما يشير إلى أن الخصائص الكيميائية sybr14 قد تكون أكثر ملاءمة لهذا التطبيق .

fig.1.fluorescence صورة الحيوانات المنوية مع اثنين من الأصباغ المختلفة ( سيبر 14 / بي و آو / بي ) . الجمع بين الصور تظهر تحليل مشرق الميدان ، الضوء الأخضر ، الضوء الأحمر ، وسم الصورة . علامة الصورة هي صورة مجمع قناة الفلورسنت ، حيث الدائرة الحمراء تمثل الخلايا الميتة ، الدائرة الخضراء تمثل الخلايا الحية .

4 الاستنتاج

وأظهرت النتائج أن كلا من sybr14 / بي و آو / بي تلطيخ يمكن استخدامها لتقييم بقاء الحيوانات المنوية ، ولكن sybr14 / بي كان أفضل . وبالإضافة إلى ذلك ، فإن مستوى التعرض وغيرها من المعالم من أجل تعديل الأداء العام الكشف عن أهمية حيوية . على الرغم من نقطة لونا - FX7 ™ على الرغم من أنه لا يهدف إلى تحسين عينات الحيوانات المنوية ، فإنه لا يزال يوفر سريعة ومريحة نظام تقييم الحيوانات المنوية من خلال تحسين نسبة التخفيف و ظروف التصوير .