2025سنة9قسم الأمراض الجلدية في كلية الدراسات العليا في جامعة كيوتو للطبناومي كيتايامافريق البحثالاتصالات البحثية الكيميائية والفيزيائية الحيويةمجلة بعنوان"استهداف PAR-2 في التهاب الجلد الأوتوبي: تقييم ما قبل السريري لمثبط E6795 الجديد"البحث . تركز الدراسة على التهاب الجلد التأتبي )مرواية البروتيني تنشيط مستقبلات2( أ )PAR - 2مثبطات جزيء صغيرE6795تقييم ما قبل السريرية ، واستكشاف دورها في تحسينمالتهاب ، حكة ، حاجز الجلد الخلل .

خلاصة

التهاب الجلد التأتبي )مهو مرض جلدي التهابي مزمن يتميز الأكزيما مثل الآفات ، الحكة الشديدة وضعف حاجز الجلد وظيفة . على الرغم من ظهور علاجات جديدة ، العديد من المرضى لا تزال تواجه مشاكل مثل عدم كفاية السيطرة على الأمراض ، وارتفاع تكلفة العلاج و تكرار المرض . بروتين تنشيط مستقبلات2( أ )PAR - 2فيمالهدف من التحقيق في التعبير عن مستقبلات هرمون الاستروجين ( PGF ) في أنسجة الجلد من الآفات الجلدية في الفئران . تقدم هذه الدراسةE6795المجمع هو جزيء صغير مصممة خصيصا لاستهداف العمليات المرضية المذكورة أعلاه .PAR - 2مثبطات . وأكد تحليل كيناز والصيدلة ،E6795تثبيط انتقائيPAR - 2في مجموعة واسعة من kinase-and-pharmacology كشف الفريق ، منخفضة للغاية تفوت بالجو التفاعل هو مبين . علاوة على ذلكE6795في كل من نماذج الفئرانمنقطة النهاية ذات الصلة ، بما في ذلك الحد من الاستجابة الالتهابية و تسلل الخلايا المناعية . الإدارة عن طريق الفم يقلل من فقدان الرطوبة عبر الجلد )تيولو2%كريم موضعي يحسن من المظاهر النسيجية و الحكة المرتبطة حاجز وظيفة . أكد الفحص النسيجيE6795بعد العلاج ، تسلل الخلايا الالتهابية انخفضت وظيفة حاجز الجلد قد تعززت . وتظهر النتائج أنE6795عن طريق تثبيط انتقائيPAR - 2إشارة الإرسال ، استهدافمثلاث ركائز الفيزيولوجيا المرضية. . . ـضعف الحاجز ، التهاب ، والحكة . وتؤكد الدراسةE6795كما جديدة وفعالة من حيث التكلفةمالأدوية الموضعية المحتملة .

تجربة .المواد والأجهزة

( أ ) المواد التجريبية

1. حيوانات المختبر11-12ذكر الأسبوعNc / Ngaالفئران6-14الأسبوع أنثىبالب/جالفئران6-10ذكر الأسبوعC57BL / 6Jالفئران .

2. الكواشف والأجسام المضادة :MC903وE6795وPAR - 2ناهض الببتيدsligkv-nh8322ndle ;وسليجرل-NH ₂التربسين ، الثرومبين ، Carboxymethyl السيليلوز ، dimethylsulfoxide ، uratam ، وجميع أنواع الأجسام المضادة الفلورسنت المسمىفليبرالكالسيوم كاشف ، كولاجينازثانيانوعDNase الأول、10%الفورمالين ، هيماتوزيلين-ایروکسین تلطيخ كاشف ، toluidine الزرقاء تلطيخ كاشف .

3. عينات من الخلايا والأنسجة الجنينية البشرية الكلى :هيك293الخلايا ، عينات الجلد من الأشخاص الأصحاء ،معينات من الجلد المصاب .

` 2 ` الأدوات التجريبية

FDSS6000نظام الكشف عن مضانFACS فورتيساقياس التدفق الخلوي ،فلوجوالبرمجيات ، قياس سماكة ، الصفر نظام القياس ،384مادة البولي بروبيلين المسامية كاشف لوحة تخزين السائل ،أنانوع الكولاجين المغلفة أسفل شفاف أسود384فتحات التهوية أقفاص ، المجاهر ، وتحليل الصورأسشالتبخر مسحفقدان المياه عن طريق الجلد أداة قياس

أسش فابوسكانفقدان المياه عن طريق الجلد أداة قياس

عملية تجريبية

1. تجربة الخليةهيك293الخلية تحتوي على3%مصل بقري جنينيDMEMمتوسطة الثقافة .384حمل خلفيفليبرالكالسيوم كاشف ، إضافة تركيزات مختلفةE6795المعالجة30دقيقة ، ثم يضاف التربسين أو الثرومبين .FDSS6000نظام مراقبة120في الوقت الحقيقي كثافة مضان في الثانيةلوجستيكنموذج حسابIC₅₀القيمة .

2. بناء وإدارة النماذج الحيوانية :

تMC903حملمنموذجبالب/جالماوس الأذن المستمر8يوم تطبيق المحليةMC903من4يوميا عن طريق الفمE6795المجموعة الضابطة أعطيت مذيب المقابلة . . . . . . .

تNc / Ngaشديدمالنموذج : سوف يعاني من التهاب الجلدNc / Ngaالفئران5المجموعة : تطبيق موضعي يوميE6795كريم مستمر7مجموعة غير المعالجة البيولوجية السيطرة .

3. تقييم الدوائية :

وظيفة حاجز الجلد : من خلالأسشالتبخر مسحفقدان المياه عن طريق الجلد أداة قياسقياس المادة0、3、7فقدان الرطوبة عن طريق الجلدالقيمة( أ )تيول) ; تم قياس سمك الأذن الماوس يوميا مع سمك متر .

أسش فابوسكانفقدان المياه عن طريق الجلد أداة قياس

( أ )(ج)）第3 اليوم و المادة7 فقدان الماء عن طريق الجلد يوميا )تيولنتائج الاختبار . بالمقارنة مع المذيبات السيطرة على المجموعة ،E6795الإدارة عن طريق الفم7 أيام يمكن أن تنخفض بشكل ملحوظتيولالبيانات التي أعرب عنها يعني ± الخطأ المعياري ( باستثناء8 اليوم مجموعة الدواء عن طريق الفمn = 3الفئات الأخرىn = 4. لا* بعد التصحيحب < 0.05مقارنة مع مذيب المجموعة الضابطة ( دنت اختبار )

تالكشف عن سلوك الحكة7أيام .الساعة 17 : 00في اليوم التاليالساعةالفئران كانت معزولة في قياس القفص .2بعد ساعة من فترة التكيف ، وسجلت من قبل نظام قياس الصفر12تواتر الخدش في غضون ساعات .

تعنوان المقال : تحليل نسيجية الأنسجة الجلد من الفئران الأذن تم جمعها في نهاية التجربة .5 ميكرومشريحةH&Eالخلايا الالتهابية تسلل سمك البشرة ، toluidine الزرقاء تلطيخ ( عد الخلايا البدينة ) وPAR - 2تلطيخ المناعى . عينات من الجلد البشري أيضاPAR - 2ايمونوهيستوشيمي الفحص .

تتحليل تدفق cytometric : تعليق خلية واحدة تم إعدادها من خلال حل بالإنزيم من الماوس الأذن الجلد .FACS فورتيساالحمضات العدلات ،CD4⁺Tالخلايا المناعية ، مثل الخلايا القاعدية ، تم الكشف عن النتائج في عدد الخلايا المطلق لكل ملليمتر مربع من الأذن الجلد .

4. الدوائية : دراسة في الفئرانE6795البلازما الحرة جزء ، جزء من الدم كله مجانا-امتصاص الجسم كله و توزيع الخصائص تم تقييمها .

5. التحليل الانتقائي : من خلال لوحة انتقائية كينازسيريبعلم الصيدلة ملزمة لوحة ، كشف1 ميكرومو10 ميكرومتحت تركيزE6795الهدف : دراسة تأثير مثبط على عدة أنواع من كيناز المستقبلات ، القنوات الأيونية ، وتقييم تفوت بالجو النشاط .

6. التحليل الإحصائي : استخدامجرافباد بريزم 7.03تحليل التباين الأحادي )اتجاه واحد ANOVAملزمةدانيتاختبار المقارنة متعددةألفا = 0.05اختبار مستوى متوسطسالخطأ المعياري )متوسط ± SEMتمثيل

النتائج التجريبية

1. E6795قوية وانتقائيةPAR - 2تثبيط تدفق الكالسيوم في الخلاياIC₅₀قيمة6.56nMعلىPAR - 1لا تثبيط و تفوت الهدف النشاط منخفضة للغاية في مجموعة واسعة من كيناز و الصيدلة لوحات .

2. الدوائية عرضE6795على الرغم من أن معدل ملزم بروتين البلازما1 ف - 4ولكن كمية صغيرة من المخدرات مجانا يمكن أن تلعب دورا في العلاج .

3. ايمونوهيستوشيمي تأكيدمالقرنية ، keratinocytePAR - 2التعبير كان أعلى من الأصحاء .

4. فيMC903محرضمنموذج الفأرE6795كل من الإدارة المحلية والشفوية يمكن أن تقلل من تسلل الحمضات .تيولتحسين وظيفة حاجز الجلد ، الإدارة المحلية يمكن أن تقلل من سماكة الأذن .

5. فيNc / Nga ADنموذج الفأر2٪ E6795كريم يمكن أن تقلل من سماكة البشرة ، تسلل الخلايا البدينة و الخدش السلوك ، وتحسين الجلد الأنسجة ذات الأداء .

6. E6795عن طريق تثبيط انتقائيPAR - 2إشارة الهدفمثلاثة النوى الفيزيولوجيا المرضية ( التهاب ، حكة ، حاجز الخلل ) يمكن أن تكون فعالة من حيث التكلفة ، مينيملي العلاج الموضعي المخدرات .