المبدأ الأساسي هو فصل الكروماتوغرافي السائل على أساس معامل التقسيم بين مرحلة ثابتة و مرحلة الجوالة . عندما يتم حقن عينة مختلطة في نظام الكروماتوجرافى السائل ، العمود الكروماتوجرافى مع المرحلة المحمول ( مثل الماء ، والميثانول ، الأسيتونيتريل ، الخ . ) بسبب الاختلافات في التفاعلات بين مكونات مختلفة و مراحل ثابتة ( مثل الامتزاز ، والتوزيع ، الاستبعاد ، تقارب ، الخ . ) على وجه التحديد ، تلك العناصر التي تتفاعل مع مرحلة ثابتة ضعيفة ، تتحرك بسرعة أكبر مع المرحلة المحمول ، وسوف تتدفق من العمود الكروماتوجرافى . في حين أن المكونات التي هي قريبة من بعضها البعض مع التثبيت ، تتحرك ببطء ، ثم تتدفق من العمود الكروماتوجرافى . من خلال هذه العملية ، مكونات الخليط يمكن فصلها واحدا تلو الآخر . وبالإضافة إلى ذلك ، فإن تأثير فصل لا يعتمد فقط على الفرق في معامل التقسيم ( الديناميكا الحرارية ) من المذاب بين مرحلتين ، ولكن أيضا على العوامل الدينامية مثل معامل الانتشار ، وحجم الجسيمات من مرحلة ثابتة

اعتبارات استخدام اللوني السائل :

1 - اختيار المرحلة المتنقلة ومعالجتها

- ينبغي اختيار مذيبات ذات درجة عالية من هبلك أو أعلى ، مع الماء المقطر الثانوي أو المياه النقية جدا ، وهي متاحة حاليا لمنع تكاثر الكائنات الحية الدقيقة وتلوث النظم .

- مرحلة الجوالة يجب أن تعاد إلى درجة حرارة الغرفة قبل استخدامها لتجنب عدم الاستقرار في الأداء بسبب الفرق في درجة الحرارة .

- عند استخدام محلول الملح المخزن المؤقت ، يجب تصفية مسار التدفق وغسلها بالماء النقي قبل وبعد الاستخدام ، ويحظر ترك محلول الملح المخزن المؤقت في مسار التدفق . وفي الوقت نفسه ، العمود الكروماتوجرافى يجب غسلها مع انخفاض نسبة العضوية المرحلة ( محتوى المرحلة العضوية لا تقل عن 5 ) ، ثم يتم تخزينها مع نسبة عالية من المرحلة العضوية لتجنب العازلة التمليح . تجنب استخدام تركيزات عالية من حمض الفوسفوريك العازلة ( > 10 ملمول / لتر ) .

- تجنب استخدام الأسيتونيتريل النقي مثل المرحلة المحمول قدر الإمكان ، وذلك لمنع بلمرة الأسيتونيتريل من امتصاص السائل . براون زجاجة تخزين ينصح عند الضرورة .

2 - مواصفات التشغيل

- يمنع إزالة الضغط العالي خط اتصالات تحت الضغط .

- ضبط سرعة التدفق بحذر ، وتجنب التغيرات الحادة في الضغط ودرجة الحرارة ، ومنع تأثير التعبئة داخل العمود .

- ينبغي إجراء تغييرات تدريجية في تكوين المذيب في حل العينة ، ولا سيما في الكروماتوغرافي العادي المرحلة ، وينبغي عدم الاستعاضة عن المذيبات العضوية بالمياه النقية مباشرة ، أو العكس بالعكس .

- الأشعة فوق البنفسجية للكشف عن مصدر الضوء يجب أن تبرد لمدة 30 دقيقة قبل الاغلاق .

3 - صيانة الأمن

- يجب جمع النفايات السائلة بطريقة سرية ، ولا يجوز تصريف النفايات العضوية السائلة مباشرة .

- صيانة المعدات بانتظام ، مثل تنظيف الإبر ، واستبدال ختم حشية .