طريقة العد الخلويسمن لوحة العد التلقائي خلية العداد

العديد من التجارب والاختبارات المشتركة تتطلب من العلماء أولا حساب عدد الخلايا أو الكثافة بدقة . وتشمل هذه العمليات صيانة خلية ثقافة بسيطة ( مثل مرور الخلية ) وكذلك التجارب الكمية ( مثل qpcr ) . عدد الخلايا يمكن أن تكتمل من خلال العديد من الأساليب ، هذه الأساليب ومزاياها وعيوبها سيتم عرضه بإيجاز في هذه الورقة .

1 لوحة العد / خلايا الدمعدمقسم

استخدام خلايا الدمعدمقسمعند أول استخدام الكحول 70 ٪ و عدسة ورقة نظيفةعدمقسمثم وضع غطاء الشريحة بلطف على لوحة العد . إذا كان غطاء الزجاج هو وضع بشكل صحيح ، نيوتن الطوق الظاهرة ( لون نمط من حلقات متحدة المركز ) يمكن ملاحظتها . أخذ جزء صغير من تعليق خلية مع ماصة ، وضع ماصة على حافة لوحة العد ، والسماح تعليق التدفق إلى غرفة العد من خلال العمل الشعري . إذا كان النشاط الخلوي هو الكشف عن التريبان الأزرق يجب أن تكون مختلطة في تعليق خلية بنسبة 1 : 1 قبل أن تضاف إلى العداد .

خلايا الدمعدمقسمفي وقت مبكر من أساليب محددة للحصول على دقة العد الخلوي ، مع شبكة خاصة على لوحة العد . عادة ، مربع كبير هو 1 ملم × 1 ملم و كذلك تنقسم إلى 0.05 ملم × 0.05 ملم شعرية صغيرة . . . . . . . حافة غرفة العد مصممة لتأمين تغطية الزجاج على 0.1 ملم فوق علامة الشبكة ، وبالتالي تشكيل منطقة معروفة الحجم .

المجهر يركز على منطقة من غرفة العد ، وذلك باستخدامعدادعد الخلايا . وعادة ما يستخدم 1 ملليمتر مربع ( 100 نانولتر ) من المنطقة ، ويستخدم 4 أو 10 مرات عدسة الهدف العد ، ولكن الاختيار يعتمد على حجم الخلية والكثافة في التعليق . هذه العملية عادة ما تتكرر في أربع مناطق مختلفة من 1 ملليمتر مربع ، مما أسفر عن متوسط . إذا تم الكشف عن نشاط الخلايا ، الخلايا الحية والخلايا الميتة تحسب على التوالي ، حيث الخلايا الميتة ملطخة التريبان الأزرق الأزرق بسبب تلف الغشاء .

الشكل 1خليةالرسم التخطيطي عد لوحة الشبكة

مزايا وعيوب

دليل العد هو وسيلة لتوفير الميزانية ، ولكن أيضا الأكثر تستغرق وقتا طويلا ومعقدة . بسبب خطأ بشري ، والموثوقية منخفضة ، لا سيما عندما عد عدة مرات بشكل مستمر . وبالإضافة إلى ذلك ، كثرة العد قد يؤدي أيضا إلى إجهاد العين . إذا كان المختبر يحتاج فقط العرضية العد و لا تحتاج إلى دقة عالية ، ثم خلايا الدمعدادهذا هو خيار جيد . ومع ذلك ، هذا الأسلوب لا يكفي في كثير من الأحيان العد ، وتحسين دقة أو تطبيقات عالية الإنتاجية . وبالإضافة إلى ذلك ، من الصعب التمييز بين أنواع مختلفة من الخلايا في تعليق دليل العد ، ما لم يكن هناك اختلاف كبير في حجم أو شكل من أنواع الخلايا .

2 التلقائي خليةعداد

التلقائي خليةعدادهذا هو سريع ، بسيطة ، الآلي بديل دليل العد . وهي تقوم على التفاعل مع خلايا الدمعدادنفس المبدأ ، من خلال عدد من الخلايا في منطقة معروفة و أخذ متوسط لإكمال العملية . هذه الأجهزة هي أيضا قادرة على التمييز بين الخلايا الحية من الخلايا الميتة من خلال القضاء على الأصباغ مثل التريبان الأزرق . التلقائي خليةعداديمكن أن يكون جهاز مستقل ، أو يمكن أن تكون متصلا إلى جهاز الكمبيوتر للاستخدام . الأغلبيةعدادبالإضافة إلى توفير عدد من الخلايا ، ولكن أيضا إحصاءات عن حجم الخلية وغيرها من المعلومات .

مضان خلية العدمِقيَاس( مثل لونا - فلوريدا ) ™ ضعف عدد الخلايا الفلوريةمِقيَاسالخلايا الحية والخلايا الميتة يمكن تمييزها عن بعضها البعض و عد الخلايا باستخدام صبغات مشتركة مثل أكريدين البرتقال و propidine اليوديد . عدد هذه الأنواع من الخلايامِقيَاسكما أنها ممتازة في عد الخلايا في الثقافات التي قد تكون ملوثة noncellular شظايا ، مثل الخلايا الأولية ، لأن الأصباغ يمكن أن تميز بوضوح الخلايا .

مزايا وعيوب

تلقائيعدادصالحعامعدد الخلايا والنشاط الكشف . فائدة نموذج يحتوي على مزايا عملية بسيطة ومنخفضة التكلفة ، ويقلل كثيرا من كمية العمل اليدوي العد . تلقائيعداددقيقة وموثوق بها ، ولكن قد تكون هناك تحديات في شكل غير منتظم ، صغيرة جدا ، رقيقة جدا تعليق أو تحتوي على العديد من الخلايا التي تحتاج إلى تمييز . بالنسبة لمعظم أنواع الخلايا والتطبيقات ، تلقائياعداديوفر كفاءة العد الأداء .

3 كولترعداد

كولترعدادبدلا من الأجهزة البصرية ، عد الخلايا عن طريق قياس التغيرات في مقاومة الميكروتشانيلس . . . . . . . المقاومة الكهربائية من الخلايا هو أعلى من ذلك من تعليق حل المنحل بالكهرباء ، وزيادة المقاومة لفترة وجيزة عندما الخلايا تمر من خلال القنوات ، وهذا التغيير يزيد مع زيادة حجم الخلية . Coulterعدادعملية مماثلة التلقائيعدادومع ذلك ، يجب تشغيل اختبار فارغة قبل الاستخدام ، وغسل المعدات بعد الاستخدام .

مزايا وعيوب

كورتعدادسرعة عالية ، يمكن أن تحسب بدقة حجم الخلايا المختلفة ، لذلك غالبا ما تستخدم في المستشفى خلايا الدم العد . ومع ذلك ، فإنه لا يمكن التمييز بين الخلايا الحية من الخلايا الميتة ، ولا يمكن أن تعول بدقة الخلايا التي تشكل مجموعات . وبالإضافة إلى ذلك ، فإن متطلبات الصيانة أعلى .

4 تدفق عداد الكريات

التدفق الخلوي يستخدم عادة لتحليل الخلايا أكثر تفصيلا ، ومجهزة تكنولوجيا الكشف عن مضان ، والتي يمكن الكشف عن المكونات المسمى داخل الخلايا . ليس كل تدفق عداد الكريات يمكن عد الخلايا ، ولكن تدفق عداد الكريات مع وظيفة قياس الحجم يمكن أن توفر درجة عالية من الدقة في عدد الخلايا ، ويمكن تمييز أنواع الخلايا من الأجسام المضادة الفلورسنت المسمى .

مزايا وعيوب

تدفق عداد الكريات هي قوية ، ولكن مكلفة ، وعادة ما تكون أكثر من 40 دولار ، 000 دولار إلى 100 دولار ، 000 ، لذلك نادرا ما تستخدم في الخلايا التقليدية العد .

5 طرق العد الخلوي الأخرى

التحليل الطيفي يستخدم أحيانا لتقدير كثافة الخليةدرجة . بسبب التعكر من الخلايا ، مع زيادة كثافة الخلية ، الضوء يمر من خلال طبق اللونية النقصان . ومع ذلك ، لأن الطيف لا عد الخلايا مباشرة ، فقط قياس الامتصاصية ، وغيرها من المتغيرات في تعليق قد تؤثر على الامتصاصية ، هذا الأسلوب لا يمكن الاعتماد عليها .

الثقافة هي طريقة أخرى عد الخلايا التي تشكل مستعمرة ( مثل البكتيريا ) . بعد تعليق خلية مخففة و رسمها في طبق الثقافة ، عدد من المستعمرات يحسب لحساب كثافة الخلية من تعليق خلية بدائية . ولكن بسبب الحاجة إلى انتظار نمو مستعمرة ، الثقافة هي أبطأ طريقة .

التلقائي خلية العد : أكثر دقة العد يجلب أفضل العلوم

نقطة في علم الأحياء يوفر لك مع مجموعة متنوعة من عالية الدقة التلقائي عداد الخلايا ، بما في ذلك مجال مشرق عداد الخلايا ، فلوري عداد الخلايا ، التلقائي عداد البكتيريا ، ومجموعة متنوعة من المواد الاستهلاكية والاكسسوارات . إذا كان لديك أي متطلبات ذات صلة ، يرجى الاتصال بنا !